紅花為菊科植物紅花Carthamus tinctorius L.的干燥花，夏季花由黃變紅時采摘，陰干或曬干。紅花含有黃酮、查爾酮、生物堿等多種活性成分［1-3］，是中藥、藏藥共有的大品種藥材，但是中、藏醫(yī)對其功效認識不盡相同。中醫(yī)用其活血通經(jīng)，散瘀止痛之效，現(xiàn)代研究也表明，紅花中主要含有抗凝血、抗血小板形成等作用［2，4］，主要用于治療心腦血管疾病。而藏醫(yī)《四部醫(yī)典》記載其“封閉脈口，治療一切肝病”，廣泛應(yīng)用于二十五味松石丸、七味鐵屑丸等治療肝病的藏成藥中，因而被譽為保肝圣藥。現(xiàn)代研究也表明，紅花提取物具有保肝、抗肝纖維化的作用［2］。我國紅花栽培歷史悠久，主要產(chǎn)地為新疆、甘肅、河南、山東、四川等地［5］。西藏林芝地區(qū)位于我國青藏高原的西南部，海拔2500～3000m，是藏藥材的主要產(chǎn)地，紅花等藏藥材種植歷史悠久，但尚未有學(xué)者對青藏高原等高海拔地區(qū)種植的紅花進行研究和報道。本課題采用《中國藥典》(2010年版)“紅花”項下的各項指標為標準，對該地區(qū)的紅花質(zhì)量進行研究。同時由于其他紅花主產(chǎn)區(qū)環(huán)境污染，包括人為等因素所致環(huán)境中的重金屬有害元素含量增加，會導(dǎo)致藥材品質(zhì)的降低，還有可能危害到人體健康，所以本文采用ICP-MS對該地區(qū)紅花中的鉛(Pb)、砷(As)、鎘(Cd)、鉻(Cr)、鈹(Be)、鉈(Tl)、碲(Te)、釹(Nd)等主要重金屬進行了研究。項研究旨在為評價該地區(qū)紅花中重金屬有害元素含量及其藥材質(zhì)量提供一定科學(xué)依據(jù)，為促進當?shù)夭厮幉暮侠硎褂煤徒】蛋l(fā)展奠定基礎(chǔ)。

1 材料

Agilent 7500ce型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀；LC-20AT高效液相色譜儀；Sartorius BP211D天平；Mars xpress微波消解儀；BHW-09C型加熱板；Labtech H210 型循環(huán)冷卻水泵。

鈹(Be)、鎘(Cd)、砷(As)、鉈(Tl)、鉻(Cr)、碲(Te)、釹(Nd)、鉛(Pb)標準物質(zhì)，均來自中國計量科學(xué)研究院。(批號分別為GSB 04-1718-2004，GBW08612 12106，GSB 04-1758-2004，GBW08614 13041，GBW(E)080117 12111，GBW(E)080548 11101，BW3134 1004，GBW08619 12062)國家一級標準物質(zhì)楊樹葉(地礦部物化探研究所GBW07604)P/A調(diào)諧液濃度(10% HNO3 介質(zhì)，Agi-lent)。調(diào)諧液(2% HNO3介質(zhì)，Agilent，批號5184-3566)；羥基紅花黃色素A對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號111637-200502)；山柰素對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號110861-200405);硝酸BVIII級；甲醇、乙腈為色譜純；磷酸為分析純；蒸餾水與純凈水(實驗室自制)；各個批紅花樣品均自采于中國藏學(xué)研究中心西藏林芝藏藥材種植實驗基地，1批樣品于采用新疆昌吉，后經(jīng)內(nèi)蒙古藥檢所周凱教授鑒定為紅花C.tinctorius的干燥花。樣品保存于中國藏學(xué)研究中心藏醫(yī)藥研究所。

2 方法與結(jié)果

2.1 重金屬研究的方法與結(jié)果

2.1.1 儀器設(shè)定參數(shù) RF功率為1200W，冷卻氣流量為20L·min-1，載氣為1.08L·min-1，采樣深度為7.5mm，蠕動泵快速提升速度為0.3r·s-1維持30s，蠕動泵分析前穩(wěn)定轉(zhuǎn)速為0.1r·s-1維持30s，數(shù)據(jù)采集時間約為3s。

2.1.2 內(nèi)標溶液的制備 精密吸取鈧(Sc)、釔(Y)、銦(In)、鉍(Bi) 的單元素標準溶液適量，以1%硝酸逐級稀釋成質(zhì)量濃度為1mg·L-1的混合溶液，搖勻，即得。

2.1.3 標準溶液的配制 精密吸取8種待測元素的單元素標準溶液適量，用1%硝酸溶液逐步稀釋成不同的濃度。以1%硝酸溶液作為標準空白溶液，見表1。

2.1.4 標準曲線及供試品測定 用定量分析方法對2.1.3項下配制的不同濃度標準溶液和2.1.6項下供試品溶液測定。測定時，儀器的內(nèi)標管始終插在內(nèi)標溶液中，依次將儀器的樣品管插入各個濃度的標準溶液(包括空白溶液)中進行測定，以每一濃度3次讀數(shù)的平均值為縱坐標，相應(yīng)的濃度為橫坐標作標準曲線。再將樣品管插入供試品溶液進行測定。線性范圍為0～50μg·L--1，見表2。

2.1.5 方法的檢出限 方法的檢出限和該方法所選用的空白溶液和試驗操作中儀器設(shè)備有關(guān)。本方法以1%的硝酸溶液作為空白溶液。平行測定空白溶液11次，計算每種元素的標準偏差(R2)，3R對應(yīng)的濃度即為各元素的檢出限，本方法中各元素檢出限都在0.019～0.561μg·L-1。

2.1.6 供試品制備 取本品0.1g，精密稱定，置于聚四氟乙烯內(nèi)管中，加8mL硝酸和2mL過氧化氫，放置2h后，置微波消解裝置中消解，消解程序，見表3。而后冷卻，用水將溶液轉(zhuǎn)移至50mL聚四氟乙烯的量瓶中并定容至刻度，搖勻，供ICP-MS測定。

2.1.7 重復(fù)性試驗 精密稱取紅花粉末0.1g，按2.1.6 項下的規(guī)定操作，平行實驗5份，測定，計算各元素含量的平均值及RSD。各元素的RSD都小于10%，表明重復(fù)性良好。

2.1.8 加樣回收率試驗 精密稱取樣品粉末(過4號篩)約0.1g于消解罐，并精密加入等量的各元素儲備液適量，按2.1.6項下的規(guī)定操作，平行實驗5份，測定，以加標前后測定的含量平均值計算各元素的回收率，見表4。各元素的回收率在83.6%～109.2%，能滿足實驗的要求。

2.1.9 隨行標準物質(zhì)測定 實驗隨行測定國家一級標準物質(zhì)楊樹葉，進一步論證方法的準確性。精密稱取標準物質(zhì)茶葉約0.10g，按2.1.6項下的規(guī)定操作，平行實驗5份，測定，計算各元素含量的平均值及RSD均在標準值規(guī)定的范圍內(nèi)。

2.1.10 供試品分析 精密稱取供試品0.10g，按2.1.6項下的規(guī)定操作，平行實驗2份，測定，計算含量，見表5。

2.2 羥基紅花黃色素A的測定［1］

2.2.1 色譜條件YMC C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動相為甲醇-乙腈-0.7%磷酸水溶液(26∶2∶72)；檢測波長403nm；流速1.0mL·min-1；柱溫30℃；進樣量10μL。

2.2.2 對照品溶液的制備 取羥基紅花黃色素A對照品適量，精密稱定，加25%甲醇制成0.131g·L-1的溶液。

2.2.3 供試品溶液的制備 取本品粉末(過3號篩)0.40g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入25%甲醇50mL，稱定質(zhì)量，超聲處理(功率300W，頻率50kHz)40min，放冷，再稱定質(zhì)量，用25%甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，按上述方法進行測定，見圖1。羥基紅花黃色素A歷年測定結(jié)果，見表6，2014年度不同采收期測定，見表7。

2.3 山柰素的測定［1］

2.3.1 色譜條件YMC C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動相為甲醇-0.4%磷酸水溶液(52∶48);檢測波長367nm；體積流量1.0mL·min-1；柱溫30℃;進樣量10μL。

2.3.2 對照品溶液的制備 取山柰素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成0.10g·L-1的溶液，即得。

2.3.3 供試品溶液的制備 取本品粉末(過3號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定質(zhì)量，加熱回流30min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補足失重，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液15mL，置平底燒瓶中，加鹽酸溶液(15～37)5mL，搖勻，置水浴中加熱水解30min，立即冷卻，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3.4 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，按上述方法進行測定，見圖2。山柰素歷年測定，見表6，2014年度不同采收期測定，見表7。

3 討論

由各批紅花中的重金屬含量結(jié)果可知，該地區(qū)紅花中所含的砷、鉛重金屬含量較少［11］。可能與該地區(qū)地處青藏高原，環(huán)境污染較少有關(guān)，為西藏林芝地區(qū)紅花的作為優(yōu)良產(chǎn)區(qū)提供一定科研數(shù)據(jù)。

通過紅花樣品中羥基紅花黃色素A和山柰素的測定結(jié)果可知，該地區(qū)收集的紅花樣品，其羥基紅花黃色素A和山柰素的含量均高于藥典標準。

該產(chǎn)地紅花2014年不同采收期數(shù)據(jù)推斷，羥基紅花黃色素A的含量受采收期影響較小；山柰素的含量受采收期影響較大，可作為最佳采摘季節(jié)提供依據(jù)。

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